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生物安全櫃的選擇和使用





新聞詳情

在臨床實驗室,操作感染性標本時或作病原體分離培養、制備菌種時會因爲樣品的振蕩、搖動、傾注、攪拌、移液等操作或液體的灑落,産生肉眼看不見的直徑<5/zrn的氣溶膠或産生直徑爲5~100腫的液滴,這些微粒中含有活的致病微生物,可以被操作者吸入或汙染工作台面上的其他樣品。生物安全櫃是一種設備,它的作用就是有效地降低實驗室獲得性感染的機會,減少人與樣品或樣品與樣品之間交叉汙染的機會,用于保護操作人員,保護實驗室環境,保護實驗材料的生物安全。

 

 

 

 

生物安全櫃的種類及特點

 

 

1.Ⅱ級生物安全櫃

  Ⅱ级生物安全柜又称为层流生物安全柜。与工级生物安全柜不同之处是进入

的空气先经HEPA过滤,保证覆盖台面上的空气是无菌的,不仅提供个人防护,也保护样品不受污染。Ⅱ级生物安全柜共分Ⅱ级A和Ⅱ级B型2种,又可进一步再分为Ⅱ级A ?、Ⅱ级A ?Ⅱ级B ?、Ⅱ级B?型。Ⅱ级生物安全是自遏型的。流动空气中的70%可以反复循环再利用。此种生物安全柜适合于细胞或组织培养、接触2~3级危险等级病原体的操作,如果穿正压防护服可在Ⅱ级生物安全柜上从事接触4级危险等级感染因子的操作。

 

(1)Ⅱ級A型生物安全櫃

    Ⅱ级A型生物安全柜(图1)有1个内置风机将实验室空气以0.38 m/s

的速率吸入安全柜,通过HEPA滤器后向下,在距工作台表面6.18 cm处分开,一半通过前面的排风格栅,另一半通过后面的排风格栅。所有实验中产生的气溶胶或液滴均被向下气流带走。气流经排出通道到达安全柜顶部的2个HEPA滤器之间,此时,约70%的气体经供风HEPA过滤器重新返回柜内操作区域被再利用,其余30%的气体经排风过滤器后被排到实验室再反复利用,或通过建筑物的排风系统排到外界。

 

 

(2)外排風Ⅱ級

    A2型、B1型、B 2型生物安全柜外排风Ⅱ级A2型、B1型、B 2型生物安全柜都由Ⅱ级A1型生物安全柜变化而来。这些生物安全柜各有特点(见表2),包括从开口吸人空气的速度、工作台面上再循环的空气量、柜内空气的排出量、安全柜的排风系统、压力装置,不同型别的生物安全柜可用于不同的实验目的(表1)。

    Ⅱ級生物安全櫃A型與B型的差異在于:覆蓋工作台表面的循環氣體和排出氣體的量不同,排出系統不同,詳細材料可以從制造商的說明書中獲得(圖2)。

 

2.Ⅲ級生物安全櫃

    Ⅲ級生物安全櫃(圖4)整個環境是完全密閉的,進入的氣體經HEPA過濾,排

出的氣體經2層HEPA過濾。有1個專門的系統保持櫃內壓力在124.5Pa,呈負壓狀態,可提供最好的個人防護作用,用于4級危險程度病原體的操作。實驗時可容2位操作人員將手伸人手套箱內進行操作。櫃旁配備1個可以滅菌的裝有HEPA過濾排風裝置的傳遞箱。櫃底下有化學消毒劑浸泡的盒子,安全櫃可與雙門的高壓滅菌器連接,接受已滅菌的物品並將用過的材料移出安全櫃作滅菌處理。可以將幾個手套箱連在一起以增大工作面積。Ⅲ級生物安全櫃適用于Ⅲ級或Ⅳ級生物安全水平的實驗室。

3.生物安全櫃的通風連接

    Ⅱ级A1型和A2型外排式生物安全柜有“套管式”或“伞形排气罩式”的连接。套管安装在安全柜的排风管上,将安全柜内排出的气体,引入建筑物的排气系统。在套管与安全柜排风管之间留有1个直径差为2.5 cm的开口,以便让实验室内的空气一起抽人建筑物的排风系统中。建筑物的排风能力必须能满足房间和柜中排风的要求。套管必须是可拆卸的或设计成可对生物安全柜进行操作测试类型。通常,建筑物气流的波动对套管式连接的生物安全柜的功能不会有太大的影响。

    Ⅱ級B1和B2型生物安全櫃通過硬管,亦即沒有任何開口地牢固地連接到建築物的排風系統,或者最好是連接到專門的排風系統。建築物排風系統的排風量和靜壓必須與生産商所指定的要求正好一致。對硬管道連接的生物安全櫃進行認證時,要比將空氣再循環送回房間或采用套管連接的生物安全櫃更費時。

 

 

4.生物安全櫃的選擇

    購買生物安全櫃時應考慮所提供的生物防護作用是針對操作人員個人的還是針對實驗樣品的;若是針對操作人員的防護應明確是針對病原微生物的還是針對有毒化學物質或兩者兼而有之。若是針對病原微生物的還應強調微生物的生物危害級別;若是針對有毒化學物質的可按照以下原則作選擇:工級或Ⅱ級A型生物安全櫃中不進行揮發性或毒性化學物質操作。Ⅱ級B1型生物安全櫃只可用于少量的揮發性或毒性化學物質的操作,如要進行一定量的揮發性或毒性化學物質的操作必須使用Ⅱ級B2型生物安全櫃。不同型別的生物安全櫃排氣特點不同,見表1。

    

生物安全櫃的正確使用和安放

 

 

1.安放

    进入生物安全柜的空气速率约是0.45 m/s,按照这种速率,气流的完整性很容易受附近人员的走动、窗户的开关、门的开启和关闭、空调运行等因素的影响。为避免上述因素的干扰,生物安全柜应放在远离人员活动、物品流动以及可能会扰乱气流的地方。为了方便起见,应在安全柜的后面、左右两侧面各留30 cm的空间,以利于安全柜的维护。上端应留30~35 cnl空间,以便准确测量空气通过排风过滤器的速度及排风过滤器的更换。

 

 

2.操作人員

    使用生物安全柜时,操作人员手臂的伸入或取出时应缓慢,垂直于前端开口处,从而保证安全柜前端气流的完整性。应在手或胳膊伸入柜中1 min后开始操作,以便安全柜对手或胳膊表面的空气进行净化处理。实验所需器材应一次性放人生物安全柜,尽量减少或限制操作人员手在安全柜中的进出次数。

3.實驗材料的放置

    Ⅱ級生物安全櫃前端開口處嚴禁被紙張、設備或其他物品覆蓋。物品放人生物安全櫃後,表面要用70%的乙醇擦拭。櫃內應備有1塊浸過消毒劑的毛巾,以便蘸吸濺出的液體。實驗材料盡量放在櫃的後面,笨重的物品放在一邊,産生氣溶膠的物品也應放在櫃的後面。實驗器材應按順序從清潔的排放到汙染的。汙染的實驗材料不。應隨時拿出櫃外,操作者的手也不應頻繁地進出安全櫃。

4.操作和維持

    大多数的生物安全柜设计成一天24 h开机,调查发现连续开机有利于控制实验室灰尘和粒子。Ⅱ级A型不用时可以关闭。Ⅱ级B型在使用时要保持实验室空气平衡,因此一天中若有数个操作过程,其间不应中断运行。实验开始前5 rain就应启动生物安全柜,净化局部空气。使用中若出现任何故障均应及时向上级人员报告并请专职技术人员维修。

5.紫外線

    生物安全櫃中不需要紫外燈。假女盯要用,每周應對燈管作清潔,除去塵埃,保證殺菌效果。應定期監測紫外燈的輻射強度。要防止紫外線對眼睛或皮膚的灼傷。

 

 

6.明火

    生物安全櫃內近似無菌的環境中應避免使用明火,一方面它可幹擾氣流運行,其次,若操作中使用揮發性或易燃物質時會造成危險。操作時需用接種環的,盡可能地用一次性的塑料接種環,使用金屬接種環的應該用微型燃燒器或電爐滅菌而不應該使用明火。

7.溢出

    在實驗室工作的每一個人都應熟知含微生物的樣品溢出時的處理程序。一旦生物安全櫃中發生有生物危害的物品溢出時,應在安全櫃處于工作狀態下立即進行清理。要使用有效的消毒劑,並在處理過程中盡可能減少氣溶膠生成。實驗完畢後,櫃中所有接觸病原體的材料均應作消毒滅菌處理。

 

 

8.清潔和消毒

    工作完毕后,柜中所有的物品都应清除表面污染并移出柜外,柜内工作台表面和柜的内壁应用含氯石灰(漂白粉)或70%乙醇消毒。若用腐蚀性的化学剂消毒后还应用灭菌水再擦洗。关机前应运行5 min,以便对残留气体进行净化。

9.清除汙染

    濾膜更換之前生物安全櫃要由專業人員用甲醛熏蒸消毒。

10.個人防護設施

    使用生物安全櫃的操作人員應穿工作服。在生物安全1~2級實驗室中工作的人員可穿普通的工作服;在3~4級實驗室工作的人穿反背式實驗隔離衣具有更好的保護效果。手套應能包住腕關節上的防護服。有些操作可能要戴口罩和眼罩。

 

 

11.警報

    生物安全櫃有發出1種或2種警報的功能。一當窗框移動時,警報會響,表明操作者將窗框移到一個不合適的地方去了,糾正以後警報解除。氣流警報表明櫃中正常氣流運行模式中斷,對操作者的保護作用和對樣品防汙染的作用減至最低,存在危險。警報響時,應立即停止工作並迅速報告上級人員。作爲制造商,在産品的使用說明書的操作部分應詳細論述這一內容,對有關人員使用生物安全櫃的培訓材料中也應有此內容。

12.生物安全櫃的認證

    每台生物安全櫃功能的完整性和操作的有效性能都應作檢定。安裝時應按國家或國際標准檢定,以後應根據制造商說明書定期由專職技術人員檢定。對生物安全櫃使用有效性的評價應包括以下內容:功能完整性實驗,HEPA濾器密封性試驗,對向下氣流速度、正面氣流速度、負壓/換氣次數、氣流的煙幕模式,以及警報和互鎖系統進行測試。還可選擇漏電、光照度、紫外光輻射強度,噪音級別,振動性等試驗。檢測人員要經過專門的培訓,采用專門的技術和儀器設備。建議由有資質的專業人員來進行測試。

    對醫學實驗室的管理人員而言,正確選擇生物安全櫃的類型,合理安放,正確使用,每年認證是一·個複雜但又必要的過程。這些活動應在有經驗並訓練有素的專家的指導下進行。這些專家應熟悉相關文獻,受過與生物安全櫃有關方面的培訓。作爲操作人員則應在使用前接受操作、保養、維護的正規培訓。

















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